AKT가 SV-HUC-1 세포주의 형질변화에 미치는 영향

• 영문명: In vitro Role of AKT in the Cell Growth of SV-HUC-1 Cell Line
• 발행기관: 대한해부학회
• 저자명: 김민규(Min Kyu Kim) 이병란(Byung Lan Lee)
• 간행물 정보: 『대한해부학회지』제40권 제4호, 329~334쪽, 전체 6쪽
• 주제분류: 의약학 > 의학일반
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 2007.08.31

국문 초록

세포신호전달 물질인 protein kinase B (PKB/AKT)는 여러 종류의 세포에서 세포의 증식을 증가시키거나 세포사멸의 억제를 통해 발암을 일으키는 것으로 알려져 있지만 그 반대의 결과도 보고되고 있고, 또한 그 작용기전은 세포의 종류에 따라 다양하다. 지금까지 정상 방광상피세포에서 AKT의 기능은 잘 알려져 있지 않으므로 본 연구는 사람 이행상피세포주인 SV-HUC-1에서 AKT 활성을 억제시킨 후, AKT가 세포성장에 미치는 영향을 관찰하고 그 조절 기전을 연구하였다. 그 결과 유전자 이입을 통한 dominent negative AKT (DN-AKT)의 과발현으로 유도한 AKT의 활성억제가 crystal violet 염색과 flow cytometry에서 세포 성장률 감소와 G1 phase 세포들의 비율 증가를 초래함이 관찰되었다. 또한, 이때 p27kip1과 전사인자인 forkhead transcription factor (FKHR)의 단백발현이 증가함이 관찰되었다. 위 결과로부터 AKT의 활성은 방광상피세포의 세포성장에 기여하며 이때 세포주기 조절 단백인 p27kip1과 FKHR가 중요한 역할을 수행하는 것으로 사료되었다.

영문 초록

Although protein kinase B (PKB, AKT) has been investigated extensively for its roles in oncogenic transformation and apoptotic prevention, controversial results are also reported. Here we assessed the role of AKT in the cell growth and expression of a key set of cell cycle regulators in the human normal uroepithelial cell line, SVHUC-1. AKT activity was suppressed by permanent transfection of dominent negative (DN)-AKT with Lipofectamine Plus. Cell viability was measured by the crystal violet assay. DNA contents stained by propidium iodide were measured by flow-cytometry for cell cycle analysis. Cell growth curve showed that overexpression of DN-AKT which suppressed the AKT activity decreased the cell growth. In the cell cycle analysis, overexpression of DN-AKT resulted in a 6% increase in the proportion of cells in G1 phase. Furthermore, DN-AKT overexpression increased the p27Kip1 protein expression and the activation of a transcription factor FKHR, which induces p27Kip1 transcription. Our results suggest that, in normal uroepithelial cells, AKT activation increases the cell growth through the influence on p27Kip1 expression and FKHR activation. Thus, AKT may be used as a biomarker for tumor transformation of bladder uroepithelial cells.

키워드

AKT SV-HUC-1 세포주 세포성장 p27kip1 FKHR AKT SV-HUC-1 cell line Cell growth Cell cycle regulators